本项目以实验室前期筛选到的来源于短小芽胞杆菌的碱性木聚糖酶基因(xynA)为目标基因,以枯草芽孢杆菌1A747基因组为模板,PCR扩增获得117个Sec途径和27个Tat途径的信号肽,构建了信号肽筛选载体pGPSX。在枯草芽孢杆菌中进行信号肽的筛选,最终筛选获得枯草芽胞杆菌中分泌该木聚糖酶的最优信号肽YnfF,其引导分泌目标蛋白效率最高,上清酶活为 327.2IU /mL。耐碱性短小芽孢杆菌木聚糖酶基因xynA可以在枯草芽孢杆菌中实现异源表达,为枯草芽孢杆菌木聚糖酶分泌表达系统的进一步优化奠定了基础。
英文主题词xylanase,singal peptide,Bacillus subtilis,shuttle vector