马蹄莲属球根花卉是优良的鲜切花和盆栽花,但目前国内生产上品种是从国外引进,开展育种应用基础科学技术研究,增强新品种培育能力,对产业可持续发展具有重要意义。本项目研究建立了马蹄莲属球根花卉小孢子培养技术体系,以及小孢子胚再生植株技术体系,通过游离小孢子培养以及花药培养均获得小孢子再生植株。花药培养技术体系的效率较高对一个花束的花药(500个)进行培养,能产生15.3个有应用价值的单倍体和二倍体植株,比游离小孢子培养方法的效率高4.4倍。共获得小孢子再生植株300株,部分基因型纯合的双单倍体新种质可为F1杂交一代育种提供亲本材料。本项目还研究并初步建立了应用小孢子衍生的愈伤组织为选择单位,马蹄莲软腐病病菌的液体培养物滤液为选择剂进行抗病突变体筛选技术。应用MSAP方法研究了小孢子胚胎发生过程中的基因组DNA甲基化和去甲基化的水平和特征,并研究了DNA甲基化抑制剂5-氮杂胞苷对马蹄莲小孢子胚胎发生的影响,这些结果对理解小孢子胚胎发生的表观遗传调控机制具有显著意义。
英文主题词calla lily; isolated microspore culture; anther culture; selection on disease resistant mutant; DNA methylation.