中文摘要：

胰腺癌是恶性程度很高的消化道常见肿瘤，发病率在全世界有逐年上升趋势。胰腺癌的预后极差，究其原因主要是其发生的分子机制不清以及病人易出现耐药状况。因此，加强胰腺癌的基础与临床研究意义重大。近年的研究表明，某些miRNAs，如miR-34能够调控靶基因Notch信号分子表达，我们的前期工作也证明miRNAs 和Notch 信号分子与胰腺癌的发生和耐药过程有关，同时还发现天然无毒副作用的大豆异黄酮可以抑制胰腺癌中Notch的表达，但具体机制不详。本课题拟用吉西他滨(gemcitabine)耐药的胰腺癌细胞株、胰腺癌orthotopic小鼠和K-ras;p16转基因胰腺癌小鼠模型，探索大豆异黄酮能否通过调控miRNAs表达，进而调节miRNAs 靶基因Notch表达, 以达到提高化疗药物吉西他滨的疗效、改善耐药状况的目的，以期为开辟胰腺癌的临床治疗新途径提供理论和实验依据。

结论摘要：

胰腺癌是恶性程度很高的消化道常见肿瘤，发病率在全世界有逐年上升趋势。胰腺癌的预后极差，究其原因主要是其发生的分子机制不清以及病人易出现耐药状况。因此，加强胰腺癌的基础与临床研究意义重大。本课题旨在探索吉西他滨治疗胰腺癌发生耐药的分子机制，揭示miRNAs 和Notch 基因等参与胰腺癌吉西他滨耐药治疗机制，研究大豆异黄酮与吉西他滨联合使用提高胰腺癌治疗效果的机制。首先，我们的研究发现大豆异黄酮抗胰腺癌作用与调控miRNAs及相关信号分子表达有关1.大豆异黄酮是通过上调miR-34a和下调Notch表达发挥抑制胰腺癌细胞生长、侵袭，诱导凋亡的作用；2.大豆异黄酮还可以下调miR-223，进而上调了FBW7的表达，大豆异黄酮抑制胰腺癌细胞生长，诱导凋亡，抑制细胞侵袭是通过下调了miRNA-223的表达和上调FBW7 的表达实现的；3. 我们还发现大豆异黄酮发挥其抗癌作用主要通过抑制了miR-27a，进一步的研究表明大豆异黄酮还上调了miR-27a的靶基因FOXO1表达。其次，我们发现吉西他滨治疗胰腺癌细胞耐药的发生与细胞发生EMT改变有关1.吉西他滨耐药的胰腺癌细胞表现出EMT表征，这些细胞迁移和侵袭能力增强；2.发生EMT的耐药细胞，miR-223的表达显著增高，通过下调miR-223，可以逆转EMT的过程、降低细胞迁移和侵袭能力、增加耐药细胞对吉西他滨的敏感性，miR-223可能是胰腺癌的一个潜在治疗靶点；3.HIF-1α可能是另一个胰腺癌的潜在治疗靶点，更多的实验结果显示，发生EMT的耐药细胞，HIF-1α表达异常增高，下调HIF-1α表达可以逆转EMT的过程、降低细胞迁移和侵袭能力。再次，我们为了进一步探讨大豆异黄酮是否能增加吉西他滨疗效的作用，我们将大豆异黄酮与miR-223 inhibitor 联合作用，分析其对吉西他滨的敏感性是否增加。研究结果显示，与大豆异黄酮、或者miR-223 inhibitor单独作用相比，大豆异黄酮与miR-223 inhibitor的协同作用，具有显著抑制细胞迁移和侵袭、逆转EMT、提高对吉西他滨敏感性的作用。综上所述，本课题的研究为临床治疗胰腺癌提供了更多的理论和实验依据。