中文摘要：

基因沉默或RNA沉默是真核生物普遍存在的一种现象，植物通过基因沉默的方式来抵抗病毒的入侵及抑制内部转座子的移动。依赖于RNA的RNA聚合酶（RdRp）在基因沉默途径中具有非常重要的作用，根据基因沉默研究的最新进展和发展趋势，以病毒诱导的基因沉默(VIGS)机制为理论依据，分离纯化新的植物RdRp，克隆其编码基因，分析RdRp结构与功能的关系及在基因沉默中的作用，并进行蛋白质结晶和蛋白质晶体结构解析的探索。创建以甜菜黑色焦枯

结论摘要：

1.在报道一种新病毒- - 甜菜黑色焦枯病毒 (BBSV)及其卫星RNA序列的基础上，分别构建了其侵染性cDNA克隆；利用突变技术对该病毒各个基因的生物学功能进行了深入的研究，并发现一种新型的胞间运动蛋白基因簇；证明了BBSV外壳蛋白基因及卫星RNA与病毒致病性的关系。 2.以BBSV为载体在植物中高效表达了轮状病毒的VP6蛋白，被免疫母鼠体内产生的VP6非中和性抗体可以经被动免疫过程传递至子代，并为仔鼠提供交叉保护。将BBSV改造为病毒诱导的基因沉默（VIGS）载体初步获得成功，将为植物功能基因组学研究提供有用的工具。 3.通过生物学、血清学以及全基因组的序列的比较，证明中国的烟草坏死病毒大豆分离物属于TNA-A；利用构建的侵染性cDNA克隆，首次发现其外壳蛋白基因5'末端18nt在病毒致病性中起关键作用。 4. 克隆获得心叶烟(N.glutinosa)的依赖于RNA的RNA聚合酶，比较DNA序列和cDNA序列证明该基因含有三个内含子。 5．利用原核表达系统，在大肠杆菌中高效表达并纯化出水稻黑条矮缩病毒（RBSDV）的外层壳蛋白P10，首次制备的抗体已广泛应用于田间该病毒的检测。