中文摘要：

蛋氨酸酶是新型抗肿瘤药物，具广谱、无毒副作用、效果明显等优点，应用前途广阔。但目前临床应用中遇到了诸如半衰期短，免疫原性强等困难。改造蛋氨酸酶基因并采用新的表达方式，是解决以上问题的可行途径。本项目将人白介素3信号肽基因及蛋氨酸酶基因融合，再构建重组腺病毒，达到在真核细胞表达分泌型蛋氨酸酶之目的。以克服以往直接应用蛋氨酸酶所具有的弊端，也可克服现有蛋氨酸酶－病毒载体的非分泌性的缺点，可望提高蛋氨酸酶抗肿瘤作用效果和应用范围，为蛋氨酸酶的实际应用提供实验和理论依据，为同类药物的研究提供借鉴。此项研究国际上尚无文献报道。本项目成功获得1个原核来源及2个真核来源的L-蛋氨酸-γ-裂解酶（简称蛋氨酸酶）基因；成功构建3个含人白介素3信号肽基因及蛋氨酸酶基因的融合基因，经测序证实与预期一致；成功将该融合基因重组入腺病毒载体；成功获得含融合基因的重组腺病毒，物理滴度（v.p./mL）达到7.7×10^11，并可在真核细胞高表达。成功构建3个含不同蛋氨酸酶基因的原核表达载体并在E.Coli高效表达，纯化后纯度达到95%。以上重组腺病毒抑制肿瘤细胞生长实验及抗荷瘤小鼠肿瘤生长实验的数据正在整理中。