乳房炎是一种危害奶牛养殖业的严重疫病。引起乳房炎的病原主要有无乳链球菌、停乳链球菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、乳房链球菌等。国内外治疗乳房炎的方法主要是抗生素疗法(单独或联合给药)。但由此而产生的耐药性和药残问题是人们急需要解决的难题。抗菌肽(ABP)是一类在两栖动物和昆虫中发现的具有广谱抗菌活性的小肽类物质。我们已成功在大肠杆菌中高效表达了ABP shiva-1基因,抑菌实验表明,ABP sh
奶牛乳房炎是由多种细菌引起的一种常见多发疾病,也是影响奶牛养殖业最严重的疾病之一。本文利用抗菌肽基因ABPS1具有广谱抗菌活性的特点,构建抗菌肽乳腺特异性表达载体,对防治乳房炎进行了初步的研究。在已构建的载体pVAX1-ABPS1的基础上,用BLG基因的启动子,分别成功构建了两个乳腺组织特异性表达载体pBLG-sABPS1和pBLG-hABPS1。另外,还构建了一个可用于干乳期乳房炎基因治疗的表达载体pCMV-hABPS1。首先利用脂质体转染法将上述两个质粒分别转染兔乳腺原代细胞,转染后48h,经Trine-SDS-PAGE分析,发现细胞培养液中有4.8kDa大小蛋白的条带出现。采用乳导管注射法,将上述两个质粒以1mg的量分别注入患有乳房炎的奶牛的每个患病乳区。在注射后第14天,注射pBLG-hABPS1的乳区,CMT和细菌总数均显著好转和降低。而注射pBLG-sABPS1的乳区,CMT和细菌总数均无明显变化。结果表明,pBLG-hABPS1用于奶牛乳房炎的防治有明显的治疗效果,为进一步研究奠定了坚实的基础。