中文摘要：

本项目选择鼻咽癌与EB病毒为研究对象，以癌基因EB病毒LMP1基因为靶点，设计合成7 种广谱而特异的10-23脱氧核酶，成功构建LMP1荧光融合可视化鼻咽癌细胞平台，在体外无细胞和细胞系统中筛选出2种有效脱氧核酶DZ167和DZ509，该脱氧核酶对鼻咽癌细胞EB病毒LMP1mRNA及蛋白均有较强抑制作用。在裸鼠鼻咽癌皮下移植瘤模型中，DZ509 也能较强抑制LMP1的表达，从而抑制瘤体的生长和转移。同时本项目利用RNA干扰技术及PCR法成功构建LMP1基因靶向pshRNA-LMP1表达载体，通过荧光可视化细胞平台优化了pshRNA-LMP1表达载体的共转染比例，筛选出具有高效特异性的pshRNA-LMP1-3519，证实其能够沉默鼻咽癌HNE1细胞中LMP1基因的表达，并能抑制鼻咽癌细胞生长,促进凋亡，同时证实了RNA干扰联合脱氧核酶可以提高抑制LMP1基因表达效率。通过体内外研究脱氧核酶及RNA干扰靶向抑制鼻咽癌EB病毒LMP1基因表达的机制及效率，为进一步进行LMP1与鼻咽癌相关性研究提供了实验基础，并为探索鼻咽癌的预防和临床治疗新方法提供初步实验依据。