化橘红为芸香科柑橘属植物化州柚或柚的干燥外果皮,是我国著名的中药材,挥发油和柚皮苷为其主要的有效成分。分泌囊是柑橘属植物普遍具有的结构特征,也是挥发油和其他有效成分产生和积累的主要部位。本项目通过多种实验手段对化橘红果实和分泌囊的结构和发育过程进行系统研究,结合果实发育过程中分泌囊的数量和发育阶段与挥发油和柚皮苷含量规律性变化关系的研究,建立该种药材果实不同发育阶段外观、分泌囊的发育程度及数量和主要有效成分含量的对应关系,为化橘红的种质资源和适时采收提供科学的外观、内部结构和植物化学三者统一的综合指标,也为该药材的规范化种植和品质控制提供科学的综合指标,建立该药材的指纹图谱。同时,通过对其果实分泌囊电镜酶细胞化学和免疫金探针标记的研究,对挥发油和柚皮苷在超微结构水平上的合成场所、转运和积累过程进行定位和分析,为最终确定挥发油和柚皮苷在化橘红以及柑橘属植物分泌囊中的合成机理提供理论依据。
Citrus grandis cv. Tomentosa;Citrus;secretory cavity;caspase 3-like protease;3D reconstruction
化橘红为芸香科柑橘属植物化州柚或柚的干燥外果皮,是我国著名的中药材。分泌囊是柑橘属植物普遍具有的结构特征,也是挥发油和其他有效成分产生和积累的主要部位。本项目详细研究了化橘红果实分泌囊形成过程中的形态发生特点,运用LM-,EM-TUNEL检测技术、免疫组织化学和免疫细胞化学方法,首次精确地阐明了果实分泌囊发育过程中Caspase 3-like凋亡蛋白酶的活动特征与染色质凝聚和DNA断裂的时空变化规律,表明其可能直接参与并在果实分泌囊的细胞程序性死亡中扮演了重要的调控者角色。柑橘果实发育过程中分泌囊的数量和发育阶段与挥发油含量规律性变化关系的研究,建立不同发育阶段外观、分泌囊的发育程度及数量和挥发油含量的对应关系,为种质资源和适时采收提供科学的外观、内部结构和植物化学三者统一的综合指标。HMG-CoA合成酶细胞化学定位的方法对柑橘分泌囊的萜类物质进行研究,揭示挥发油合成的确切部位。运用三维重建技术,对柑橘整个果实的分泌囊进行三维重建,揭示出果实中分泌囊的数量和分布部位。因此本项目的研究具有重要的理论价值和实践意义。