中文摘要：

冠心病是严重威胁人类生命与健康的主要疾病之一。近年来，治疗性的促血管生成用于心肌缺血的治疗已引起人们的广泛重视。目前，以碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）治疗严重心肌缺血病的II期临床研究正在进行。但是，由于多数促血管生成因子在体内的半衰期较短，因此为了提高局部缺血心肌部位的药物浓度，增强治疗效果，目前皆采用借助于导管或外科手术的局部注射法。此方法需要的技术难度很高，往往给病人带来创伤，临床应用受到很大限制。本研究将采用对缺血心肌有特异性标记的Annexin V为载体，以构建的链霉亲和素-AnnexinV融合蛋白进行预定位，将生物素化bFGF聚集于心肌缺血部位，从而可望大大增强其治疗效果。同时将对以生物素化Annexin V和链霉亲和素为介导的三步预定位的治疗效果进行比较研究。本研究首次提出了对缺血性心脏病进行靶向治疗的新概念、新措施，可望为临床冠心病的的治疗提供一条简单高效的新途径。

结论摘要：

本课题研究了Annexin V-streptavidin 融合蛋白在大肠杆菌中的表达及纯化及bFGF的生物素化及活性测定的研究；对生物素化的bFGF的体内外活性进行了初步的研究。本课题重点研究研究了心肌细胞的凋亡机理及预防心肌细胞凋亡的的实验方法。研究表明Sphingosine kinase（SK1）在保护心肌的缺血损伤具有明显的保护作用。鉴定了SK1在心肌细胞的作用靶点FHL2.FHL2为SK1在心肌细胞中的抑制蛋白，抑制FHL2可保护心肌细胞的凋亡。另外我们研究凋亡激酶Mst1在心肌细胞中的作用机理。在心肌细胞缺血时，Mst1的激酶活性被激活，从而诱导心肌细胞凋亡。以酵母双杂交的方法寻找Mst1在心脏中的底物。我们的研究表明，心肌肌钙蛋白I为Mst1的新底物。Mst1可磷酸化心肌肌钙蛋白I Thr31,Thr51,Thr129和Thr144。Mst1诱导的心肌肌钙蛋白I磷酸化进一步改变了心肌肌钙蛋白复合物中蛋白与蛋白间的相互作用。我们的研究首次鉴定了Mst1为新的心肌肌钙蛋白I磷酸化激酶。Mst1可能在心肌细胞的收缩功能调控中起重要作用。