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人噬菌体抗体库的构建及人源性bFGF抗体的筛选
  • 项目名称:人噬菌体抗体库的构建及人源性bFGF抗体的筛选
  • 项目类别:面上项目
  • 批准号:30471607
  • 申请代码:C0807
  • 项目来源:国家自然科学基金
  • 研究期限:2005-01-01-2005-12-01
  • 项目负责人:邓宁
  • 负责人职称:副教授
  • 依托单位:暨南大学
  • 批准年度:2004
中文摘要:

抗bFGF抗体具有限制肿瘤细胞增殖和抑制血管新生从而达到治疗肿瘤的作用,此外,抗bFGF抗体还可用于矽肺纤维化的预防和治疗。本研究(1)对395份血样标本进行了检测,从多份自身免疫患者血样标本中检测到高滴度抗bFGF自身抗体,其中慢性肾炎患者抗bFGF抗体的阳性率高达27.79%,类风湿患者的阳性检出率达11.76%,进一步证明了bFGF自身抗体广泛存在于自身免疫患者中。(2)收集高滴度抗bFGF抗体患者血样,直接从收集到的20 份含高滴度抗bFGF自身抗体的患者血样,分离淋巴细胞,经RT-PCR获得轻、重链基因,成功构建了抗bFGF噬菌体抗体库,抗体库的库容为2.5×107 。对该抗体库的鉴定结果显示,该抗体库具有较高的bFGF特异性,和一定的多样性。对该抗体库进行3轮固相抗原筛选,筛选的效率为38%。三轮筛选后随机挑选16个噬菌体抗体克隆,经酶切鉴定和ELISA鉴定,成功获得了具有高亲和力抗bFGF的抗体克隆。经测序分析显示,成功获得了人源性抗bFGF抗体基因。(3)制备了bFGF单克隆抗体,从18株高效价的杂交瘤细胞株中挑选到3株具有抗肿瘤活性的细胞株。并已经克隆到该单抗可变区基因。

结论摘要:

英文主题词bFGF,human antibody, antibody library, scanning


成果综合统计
成果类型
数量
  • 期刊论文
  • 会议论文
  • 专利
  • 获奖
  • 著作
  • 3
  • 3
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