化疗是肺癌的主要治疗方法,但有效率不足50%,其耐药性与肺癌细胞的微环境有关。肺癌细胞生活在低糖、缺氧及酸中毒的微环境,可诱导糖调节蛋白(GRPs)的合成,其中GRP94、GRP78与耐药性的关系尤为密切。微流控芯片体系可将进样、反应、检测等过程集成或基本集成到一张芯片上完成整体实验室的工作,速度快,效率高,可协助进行单细胞水平的分析。本项目采用微流控芯片体系对四种人肺癌标准细胞株,分别在三种模拟
耐药性是影响肺癌化疗的主要障碍,化疗前正确的耐药性分析是提高疗效的关键。目前常用的MTT等耐药性分析技术难以同时完成多样本的检测,且操作复杂、灵敏度较低,临床应用受到一定的限制。微流控芯片是一项发展中的技术,以高通量和规模集成为主要特点,能够将进样、分离、检测等过程集成到一张芯片上,完成整体实验室的工作。本项目采用微流控芯片体系,模拟肺癌细胞生长的三种不同微环境,即普通条件、诱导及抑制糖调节蛋白78/94(GRP78/94)合成的条件,分别对四种人肺癌标准细胞株中GRP78/94 在核酸和蛋白水平的表达以及它们对VP-16等化疗药物的耐药性进行了检测,分析了GRP78/94的表达与肺癌耐药的相关性。作为对照,同时采用临床常用的细胞培养及MTT等常规方法,对上述细胞株及54例肺癌组织进行GRP78/94的检测及耐药性分析。结果表明,GRP78/94与肺癌化疗耐药具有相关性,且两种技术平台检测结果一致,但与常规技术平台相比,微流控芯片平台显示了试剂消耗量少、反应速度快、检测效率高等优点,并可在单细胞水平进行检测、分析,表明该体系可用于细胞培养及功能性研究,在医学上具有良好的应用前景。