新型隐球酵母是重要的病原真菌,八十年代以来感染呈上升趋势,对其致病机理了解不多,治疗药物也很有限。毒性因子表达是其致病过程的关键,因此研究毒性因子的表达调控一直是领域的热点。本申请拟利用一种高通量方法寻找新型隐球酵母毒性因子-漆酶调控的关键基因,分析这些基因的作用机理。我们使用了构建新型隐球酵母的过表达转化体库和农杆菌介导的全基因组随机插入突变体库,从中筛选不同条件下漆酶表达的突变体,并且通过pasmid rescue和TAIL-PCR等方法克隆功能基因,鉴定该基因,分析其功能,在漆酶和其它致病因子表达中的作用。为阐明新型隐球酵母的致病基础提供知识,为寻找新的抗真菌的药物靶位点提供理论依据。
英文主题词Cryptococcus neoformans,laccase, miRNA,virulence factor