中文摘要：

川丁特罗是沈阳药科大学自主合成的具有知识产权的一种新型长效抗哮喘药物。迄今为止，关于其代谢方面的研究很少。结合结构类似药物马步特罗的代谢过程及本实验室对川丁特罗代谢研究的前期工作，推测其叔丁基羟基化代谢产物很可能有活性，同时还发现川丁特罗在体内及体外代谢均有常与药物的毒副作用有关N-氧化物产生，因而对这二个潜在活性及毒性谢途径的研究显得分外重要。本项目拟通过川丁特罗的体内外代谢研究，寻找川丁特罗的在大鼠体内可能的活性及与毒性有关的重要Ⅰ相代谢物，阐明该药物在体内的相关重要代谢途径，明确其可能的活性及毒性代谢机制，在此基础上进一步研究川丁特罗在人体内重要代谢途径，再利用体外代谢实验阐明其代谢机制，确定药物转化的主要参与酶，评价药物及其重要代谢物与代谢酶间的相互作用，为理解该药物代谢的机制、预测川丁特罗的药物相互作用及临床安全合理用药提供依据，同时也为新的特罗类抗哮喘药的研发提供参考。

结论摘要：

通过对川丁特罗的短刺小克银汉霉AS 3.970制备规模的转化液样品和大鼠多剂量灌胃给子川丁特罗后收集的尿液样品中的代谢物的分离纯化，获得了5种代谢物对照品；设计并优化了川丁特罗羟胺衍生物的合成方法，通过同生物体内代谢物色谱和质谱行为的比较，确认其为川丁特罗体内代谢物之一。并与6种代谢产物对照品比较，结合药物体内代谢规律，系统研究川丁特罗在大鼠体内和微生物模型中的代谢情况，鉴定了代谢物结构。观察到大鼠体内代谢途径主要单羟基化、C-氧化、乙酰化、葡萄糖醛酸化，这些代谢途径还可能相互交叉，生成次级代谢产物。此外，还发现了一种新的重要的代谢途径，即谷胱甘肽结合及其进一步发生分解代谢、氧化代谢途径。利用与对照品对照和依据一级、二级质谱信息并参考药物体内代谢规律推测得方法研究了川丁特罗在人体内的代谢情况。川丁特罗在人体主要的代谢物也存在于大鼠体内，所以，川丁特罗在大鼠和人体内的代谢途径基本相似，不存在质反应方面的种属差异。通过对经葡萄糖苷酸酶水解后尿液样品的分析，计算得到川丁特罗及代谢物M2、M3的葡萄糖醛酸结合物的累计排泄量占给药剂量的百分比。大鼠灌胃给予川丁特罗后，原形药、M2 、M3、M4、M7、原型的葡萄糖醛酸结合物及M2和M3的葡萄糖醛酸结合物物的累积排泄总量约为给药剂量的28%。针对上述几种形式而言，尿液是最主要的排泄途径，其次是粪便，二者的比值约为7.6:1。结合化学抑制剂法和重组酶法，最终确定CYP2C19、CYP2D6和CYP3A4可催化川丁特罗生成芳香羟胺代谢物M2，CYP2C19和CYP3A4均可催化川丁特罗生成代谢物M3，CYP2E1是催化生成M4的主要代谢酶。采用混合探针底物法来研究了川丁特罗和代谢物M3、M4对HLM中重要CYP450酶CYP1A2、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6和CYP3A4/5的抑制作用。川丁特罗和代谢物M3、M4对HLM中CYP1A2、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6、CYP3A4/5的活性没有抑制作用。原代人肝细胞经川丁特罗诱导72 h后，未发现川丁特罗对CYP1A2和CYP3A4/5活性有诱导作用。结果表明川丁特罗在临床用药剂量下不会介导产生代谢性药物相互作用。静脉注射和口服给药后，在大鼠体内，均观察到了明显的双向构型转化。灌胃给药时川丁特罗单一对映体的手性转化程度明显大于静脉注射。