本项目是在已克隆的人鼻咽组织相对特异新基因YH1的基础上,深入研究它在调节鼻咽癌(NPC)细胞表型和功能改变中的作用,并探测它在鼻咽癌变发生中的分子机制。采用SSCP检测YH1基因在正常鼻咽、高分化和低分化NPC组织中的差异表达的分子机制。构建小分子干扰核糖核酸(SiRNA)及表达质粒,转染人高分化和低分化鼻咽癌细胞株CNE-1和CNE-2Z细胞,分别获得稳定表达SiRNA-YH1和高表达YH1的细胞株。利用MTT、流式细胞分析、软琼脂集落形成及裸鼠体内成瘤实验,探测YH1的抑瘤能力。利用哺乳动物双杂交系统,捕获YH1作用的靶点及干预的信号传导通路。采用分子动态结合模拟技术,提供YH1与其结合蛋白相互作用的分子结合模型。本课题的完成将深入阐明NPC的发生机制,为建立NPC动物模型奠定理论基础,也将提供一个新的NPC诊断分子指标和可能用于临床治疗的分子靶点,并为其他新基因功能的研究提供参考。
英文主题词nasopharyngeal carcinoma (NPC), novel gene; mammalin two-hybrid system; small interfering RNA; molecular dynamics simulation.