中文摘要：

补体因子C3d 能够有效地增强与其结合的抗原分子的免疫原性。我们的前期研究证实，鸡补体因子C3d虽然也有此功能，但其基因结构上与其它动物有很大差异。本研究拟将1－2个拷贝串联的C3d基因和禽流感病毒的M2连接，制备含M2-C3d的融合蛋白和DNA疫苗免疫SPF鸡，应用免疫细胞化学染色和流式细胞仪体外检测B细胞增殖；实时定量逆转录聚合酶链反应（Real time RT-PCR）法、染色质免疫沉淀分析（CHIP）等技术检测NF-κB的mRNA水平和表达以及核移位情况；用Western Blotting检测蛋白酪氨酸激酶（PTK）活化、I-κB磷酸化；用荧光分光光度计测定细胞内Ca2+浓度变化；用蛋白结合法测定细胞的环化腺甘酸（CAMP）变化；探讨鸡C3d和鸡B细胞及Raji细胞的表面受体结合及其胞内信号转导通路，从分子和细胞水平阐明鸡补体因子C3d增强B淋巴细胞对抗原免疫应答的作用机理。

结论摘要：

以前的研究证实，在哺乳动物的免疫系统中，补体分子C3d作为分子佐剂在先天性免疫和获得性之间发挥桥梁作用。C3d的这种功能是通过降低B细胞活化的阈值，促进B细胞增殖来实现的。由于禽类的免疫系统的结构与哺乳动物有很大差异。为了阐明鸡补体因子C3d增强B淋巴细胞对抗原免疫应答的作用机理，在本研究中，我们首先进行了鸡补体因子C3d的基因克隆及序列分析，然后将鸡补体因子C3d基因与禽流感病毒M2基因融合后的1-3个串联产物分别在原核和真核系统中表达，再将纯化原核表达产物和DNA疫苗分别进行Balb/c小鼠和SPF鸡的免疫试验，并对免疫鸡B淋巴细胞形态和增殖情况进行研究。结果发现，鸡的补体因子C3d与其它哺乳动物的C3d氨基酸序列的同源性较低，而且与B细胞的CR2结合区的氨基酸与其它动物有很大差异。进一步的研究证实， 鸡补体因子C3d无论是在原核系统表达的融合蛋白，还是插入DNA疫苗中均可以增强禽流感病毒M2蛋白引起的免疫应答反应，与C3d融合了的禽流感病毒M2蛋白对鸡B淋巴细胞的增殖有明显影响，提示C3d结合BCR的信号可能经过某一通路引起B细胞内发生一系列的生理变化。