外源基因进入细胞核的转运是目前非病毒基因转运系统难以解决的问题。我们的研究中,将核转运蛋白HMGB1与非病毒载体PEG-PEI及DNA复合生成三元复合物。以期HMGB1能协助非病毒载体将外源DNA转运入细胞核;PEG的修饰能降低PEI的细胞毒性。同时考察该系统转运血管内皮生长因子(VEGF)基因在血管再生中的作用。研究结果显示应用两步法DNA、HMGB1和PEG-PEI能生成三元复合物。DNA和HMGB1可相互结合,但HMGB1不能有效压缩DNA。而PEG-PEI能有效压缩DNA和HMGB1形成球形纳米粒子。共聚焦显微镜观察HMGB1/PEG-PEI复合载体能显著提高DNA在细胞核的聚集。HMGB1/PEG-PEI复合载体的转染效率为PEI25KDa的2.6-4.9倍;VEGF蛋白的表达量为PEI25KDa的1.4-2.8倍。动物实验结果显示HMGB1/PEG-PEI复合载体转染VEGF165基因后,VEGF的mRNA、蛋白表达量及促血管新生作用优于PEI25KDa组和质粒组。
英文主题词HMGB1; combined vectors; nuclear transport; angiogenesis