提高小麦加工品质的理论与转基因育种研究一直受重视,随着新基因功能鉴定的进展,假说"小麦面团弹性取决于谷蛋白亚基通过分子间二硫键的交联所形成的大聚合体"受到争议。本项目研究富含半胱氨酸残基的小麦avenin-like b 蛋白的功能,旨在推进小麦面团弹性形成机理的认识。以小麦品种郑9023为对象,采用PCR和反向PCR方法,分离获得了4个avenin-like b等位基因和1个全长1664 bp的该基因启动子;采用RT-PCR、Western blot和农杆菌介导的转基因方法,发现avenin-like b基因及其启动子都具有胚乳特异性的表达特性;进而,采用基因枪法获得了avenin-like b 转基因小麦,并借助Southern 和Western Blot 方法,明确了转基因为低拷贝并且正确、稳定和超量表达;通过Mixography 和SE-HPLC 分析,发现转基因小麦面团弹性显著增强,并提出单体含量减少而小聚合体含量增加是主因。这不但为小麦面团弹性形成的假说提出了新问题,而且所获得的转基因小麦在受体郑9023高产适应性广的基础上大幅度提高了面团弹性,应具有应用价值。
英文主题词Transgenic wheat lines; avenin-like b gene; endosperm specific expression; dough elasticity