本项目通过建立和完善杆状病毒-家蚕幼虫多基因表达技术平台,研究轮状病毒样颗粒在家蚕幼虫的表达、组装、纯化以及其免疫原性和免疫保护效果。我们建立了高效多基因表达家蚕生物反应器技术平台,能迅速简便地将10个外源表达盒引入家蚕杆状病毒基因组MultiBmBacmid中,直接注射家蚕幼虫即可获得感染性病毒。应用该多基因表达系统,构建了同时表达多个拷贝轮状病毒结构蛋白的重组病毒。含双拷贝VP2,VP6和VP7重组病毒的轮状病毒样颗粒装配效率是单拷贝病毒的3.3倍。将纯化后的三层轮状病毒样颗粒经肌肉注射,鼻腔接种和口服三种方式免疫BALB/c 小鼠。结果发现,低剂量VLPs经注射接种后,血清中检测出高水平抗轮状病毒的特异性抗体,其免疫保护效果为92%。 稍高剂量VLPs 鼻腔接种也能诱导相当水平的特异性抗体,其保护效果可达85%。使用最高剂量VLPs口服接种,产生特异性抗体水平最低,其免疫保护效果仅为39%。因此所生产的3层轮状病毒VLPs有望成为的安全高效的轮状病毒疫苗。到目前共发论文6篇,获批国家发明专利1项, 指导5名硕士研究生毕业。更多的成果将在2-3年发表。
英文主题词mutigene expression system; virus-like particles; rotavirus ,vaccine, silkworm bioreactor