中文摘要：

子痫前期血清中来源于胎盘或内皮细胞的血管活性因子，引起血管平滑肌细胞内钙离子聚集及细胞外基质合成增加是胎盘血管病变的分子基础，前期研究发现蛋白激酶C(PKC)介导前胶原Ⅰ表达增加在子痫前期胎盘血管平滑肌细胞（SMC）病变过程中起重要作用，而磷脂酶C（PLC）-磷脂酰肌醇二磷酸（PIP2）-PKC途径是血管活性物质介导SMC收缩与合成功能紊乱的关键调控途径，本课题组拟体外模拟子痫前期的体内环境，对胎盘血管内皮细胞与SMC共培养, 早发重度子痫前期血清作用于共培养细胞，利用RNA干扰、受体阻断、荧光共聚焦显微镜、酶促反应等分子生物学技术，探讨子痫前期血清对子痫前期胎盘血管SMC收缩与合成功能改变的分子机制以及PLC-PIP2-PKC信号途径对其的调控作用。明确早发重度子痫前期患者血清激活胎盘血管SMC PKC的上下游信号转导通路，拟为早发重度子痫前期的期待治疗提供重要的理论依据及治疗靶点。

结论摘要：

课题完成情况课题组成员体外进行脐动脉血管平滑肌细胞（HUASMC）与脐静脉内皮细胞（HUVEC）共培养，子痫前期血清处理共培养细胞，模拟子痫前期体内环境，观察PLC-γ1是否参与平滑肌细胞蛋白激酶C-α（PKC-α）的激活与细胞外基质前胶原I的表达、钙离子内聚情况以及磷脂酶C-γ1-三磷酸肌醇受体（PLC-γ1- IP3R）信息途径是否参与平滑肌细胞钙离子内聚的调控，拟探讨子痫前期血管平滑肌细胞痉挛性收缩的分子及其信息调控机制，本项目组经过项目组成员3年努力，本项目顺利完成。取得成果本课题组成功培养原代脐血管内皮细胞与平滑肌细胞并建立共培养体系；研究结果显示子痫前期血清通过激活PLC-γ1途径促进共培养HUASMC细胞PKC-α活性及前胶原Ⅰ表达，不影响前胶原III表达，与本课题组早期研究结果一致，PLC-γ1-PKC-α信息途径介导前胶原I表达增加与胎盘血管管壁增厚，管腔狭窄关系密切；子痫前期血清促进共培养平滑肌细胞PLCγ-1-PI3R信息途径激活，促进共培养HUASMC细胞钙离子内流；PLC-γ1siRNA沉默共培养平滑肌细胞PLC-γ1表达可抑制子痫前期血清引起PI3R活性及钙离子内聚。提示子痫前期血清激活内皮细胞与平滑肌细胞共培养体系血管平滑肌细胞PKCα经由PLCγ介导，子痫前期血清通过PLCγ-IP3信息途径促进胎盘血管平滑肌细胞钙离子内聚及细胞外基质表达与沉积参与子痫前期的病理过程；子痫前期血清钙离子浓度与收缩压呈负相关，产后血钙及血压均恢复正常，共培养平滑肌细胞三磷酸肌醇受体-Ⅰ小干扰RNA(IP3R-ⅠsiRNA)沉默平滑肌细胞IP3R表达，斯里兰卡肉桂碱阻断兰诺定受体（RyRs）通路后，子痫前期血清促进平滑肌细胞钙离子内聚；子痫前期患者血管平滑肌细胞外钙内流及内钙释放致细胞内钙离子浓度增加是平滑肌细胞痉挛性收缩的关键因素，研究成果在国家核心期刊发表论著7篇（SCI收录2篇），综述1篇，培养在读研究生3名。临床意义PE患者血管平滑肌细胞外钙离子内流与IP3R介导的细胞内钙离子释放引起细胞内钙离子增加是导致血管平滑肌细胞痉挛性收缩的重要分子基础，为临床降压药的选择与应用提供循证依据，也为子痫前期的病因研究提供重要线索。