据RNAi技术原理,首先设计合成并筛选出高效特异干扰小鼠酪氨酸酶基因的短干扰RNA(siRNA);直接将化学合成的稳定的siRNA注射到C57小鼠(黑毛)体内,观察白化表型的产生;并构建酪氨酸酶基因siRNA表达框,通过雄原核注射法将其导入小鼠受精卵,让其随机整合入小鼠基因组,制作出表达酪氨酸酶基因siRNA的转基因白化小鼠,并培育成可遗传的小鼠模型群体。以此作为切入点,探讨利用RNAi技术制作基
据RNAi技术原理,首先设计合成并筛选出高效特异干扰小鼠酪氨酸酶基因的短干扰RNA(siRNA);按不同的方案(不同的剂量和时间)直接将化学合成和修饰的稳定的siRNA注射到C57小鼠(黑毛)体内,观察白化表型的产生及小鼠体内各脏器酪氨酸酶的变化。以此作为切入点,探讨利用RNAi技术制作基因打靶动物模型及研究基因功能的可行性。该技术与传统的基因敲除相比具有快速高效、成本低廉的优点。本研究完成后可获得如下成果建立利用化学合成和修饰的稳定的siRNA直接注射到小鼠体内产生基因沉默(RNA水平的基因打靶)小鼠模型的方法及技术平台。