中文摘要：

干扰素作为肝细胞肝癌的治疗手段之一，有着较为肯定的疗效。其中，通过激活机体免疫反应，诱导内源性干扰素的产生则受到越来越多的重视。研究发现5′-端三磷酸化的小分子干扰RNA（3p-siRNA）能够诱导干扰素的产生，即3p-siRNA在对靶基因进行沉默的同时可以诱导内源性干扰素的产生。MACC1是2009年新发现的一个癌基因，我们课题组在前期的研究中发现其参与了肝癌的发生、发展过程。因此，本研究通过构建针对MACC1基因的3p-siRNA，在对靶向MACC1癌基因沉默的同时，激活并诱导细胞内源性干扰素的产生，从而实现对肝细胞肝癌治疗的双重联合作用。本课题首次将5′-端三磷酸化的小分子干扰RNA（3p-siRNA）应用于肝细胞肝癌的实验研究中，通过激活机体免疫反应诱导内源性干扰素的产生，并联合沉默癌基因来促使肝癌细胞凋亡，这为肝癌的干预治疗提供了新的思路，具有重要意义。

结论摘要：

MACC1（metastasis-associated in colon cancer-1, MACC1）基因是2009年由Stein等发现并命名的一个新基因。Stein等研究发现，MACC1 作为肝细胞生长因子(HGF) /c-MET信号通路的一个关键调节因子在结肠癌的侵袭和转移中发挥着重要作用。MACC1编码的蛋白质作为HGF/c-MET信号通路中c-MET基因的转录激活因子，可以明显地上调结肠癌中c-MET蛋白的表达，促进肿瘤细胞的侵袭和转移，并且MACC1的表达在HGF诱导的肿瘤细胞的侵袭转移中也起了十分重要的作用。以往研究表明，HGF/c-MET信号通路在包括肝癌在内的多种肿瘤的发生发展中起了十分重要的作用，HGF 作为离散因子,具有促进肝癌细胞的侵袭和转移的作用。近年来的研究表明，针对肝细胞肝癌的单一治疗手段往往有其局限性，效果较差，而综合性的治疗方法则受到越来越多的重视。在各种治疗手段中，干扰素在肝细胞肝癌中的作用引起了人们越来越多的关注，多个研究结果表明，干扰素可以明显改善患者的预后、提高患者的生存率。研究发现5＇三磷酸化的小分子干扰RNA（3p-siRNA）能够诱导干扰素的产生，即3p-siRNA在对靶基因进行沉默时可以诱导内源性干扰素的产生，且二者的作用不会互相影响。因此通过RNA干扰技术对靶向癌基因沉默的同时，激活并诱导细胞内源性干扰素的产生，从而实现对肝细胞肝癌的双重联合作用，这在对肝细胞肝癌的干预治疗中具有极其重要的意义。本研究历时三年完成，先后报道了MACC1在肝癌组织中的表达情况及与患者预后疗效的关系；证实了MACC1可以促进肝癌细胞Huh7的迁移、侵袭能力并上调MMP-2和MMP-9蛋白的表达，MACC1可以通过激活HGF/c-MET/p-AKT信号通路，抑制肝癌细胞的凋亡；并最终证实了5＇端三磷酸化修饰的MACC1小干扰RNA既可以沉默MACC1基因，又可以诱导IFN-β的生成，从而抑制肝癌细胞的增殖能力。综上所述，本项目研究基本上达到实验预期目标，为肝细胞肝癌的治疗提供了新的方向。本课题首先探讨了MACC1蛋白促进肝细胞肝癌发生发展的分子机制；而且从诱导内源性干扰素产生及联合癌基因沉默这一角度出发，探讨了其对肿瘤细胞诱导凋亡的作用机制，为肝细胞肝癌的治疗提供了一个新的途径，具有重要的理论意义和极其广阔的应用前景。