中文摘要：

膀胱癌是泌尿系统中最常见的恶性肿瘤，其病因和发病机制尚不十分清楚，目前难以实施有效的预防和治疗。最近，欧美人群的膀胱癌全基因组关联研究（GWAS）发现染色体3q28区域的rs710521可能是膀胱癌的易感位点，但随后多个研究包括本课题组已发表的中国人群结果并不完全一致，而且至今尚未对此区域进行其他位点的筛选及功能学研究。本课题在前期研究结果的基础上，通过生物信息学确定该区域候选SNPs，拟采用两阶段病例-对照研究，探讨染色体3q28区域遗传变异与中国人群膀胱癌发病风险的关联，分析评价基因型-临床表型以及基因-环境交互作用。在此基础上，采用一系列细胞分子生物学手段进一步探讨SNPs的功能学效应，阐明染色体3q28区域SNPs参与膀胱癌发生发展的可能生物学机制，为建立膀胱癌的风险预测模型和个体化治疗提供新的线索。

结论摘要：

膀胱癌是最常见泌尿系统肿瘤之一。首个欧美人群的膀胱癌全基因组关联研究（GWAS）发现染色体3q28区域的遗传变异是膀胱癌的遗传位点。然而，该区域的致病位点尚不完全清楚。本研究采用“精细作图”策略，筛选出该区域41个SNPs，采用两阶段的病例-对照研究，分析3q28区域遗传变异与膀胱癌遗传易感性的关系，并探讨潜在功能性位点的生物学机制。 我们在第一阶段病例-对照研究中，共纳入540例膀胱癌患者和555对照。结果发现TP63基因3’-UTR的rs35592567位点TT基因型与CC基因型相比，能够显著降低膀胱癌的发病风险（OR = 0.35，95% CI = 0.17-0.71）。我们在第二阶段的840例膀胱癌患者和1044例对照样本中进一步验证，发现rs35592567 C>T在相加模型中仍可降低膀胱癌的发病风险（OR = 0.81，95% CI = 0.68-0.96）。两阶段合并后，发现rs35592567的T等位基因降低了21%的膀胱癌患病风险（OR = 0.79，95% CI = 0.69-0.90）。生物信息学预测，发现TP63的3’-UTR的rs35592567位于miR-140-5p结合区域，因此我们通过双荧光素酶报告基因实验，构建了TP63 3'-UTR报告基因。结果表明，rs35592567 的T等位基因能够降低miR-140-5p与 TP63基因3’-UTR的结合能力，从而导致TP63表达上调。同时，体内实验发现36对膀胱癌组织中有23对癌组织TP63 mRNA的表达均高于相对应的癌旁正常组织（P = 0.016），而miR-140-5p在29对膀胱癌组织中的表达水平显著低于相应的癌旁正常组织（P < 0.001），且两者表达水平呈负相关（P < 0.001）。同时，膀胱癌组织中TAp63蛋白表达水平显著高于癌旁正常组织（P < 0.001）。 综上所述，TP63基因上的rs35592567多态性位点可能通过改变miR-140-5p与TP63基因3’-UTR区的结合能力，从而影响了TP63的表达，导致膀胱癌的遗传易感性。该研究的发现对于膀胱癌的早期诊断和预防具有一定的指导意义。