cfr基因是一种可介导五类抗菌药物(氯霉素类、林可霉素类、截短侧耳素类、恶唑烷酮类、链阳菌素类)耐药的甲基转移酶基因。这种耐药基因在动物源和人源葡萄球菌中的出现与流行对公共卫生和医学临床的潜在危害引起了人们的高度关注。本项目通过PCR技术筛查cfr基因在我国动物源革兰氏阳性菌(葡萄球菌、肠球菌、链球菌、芽孢杆菌)的流行现状,应用PFGE技术研究cfr阳性菌株的亲缘关系,采用southern杂交定位、质粒可转移性和不相容性分析、介导cfr基因转移的遗传元件结构图绘制及解析来探明cfr基因在不同动物源革兰氏阳性菌中传播的分子机制。上述研究能更全面的揭示cfr基因的流行传播机制,加深对养殖用药促进动物源耐药菌/耐药基因产生、传播的认识,为动物源耐药菌/耐药基因的转移扩散的风险评估和防控提供重要科学依据。
cfr gene;insertion sequence;plasmid;mechanism of dissemination;food producing animal
本项目针对我国动物源细菌耐药性快速发展现状,重点开展了对介导五类药物耐药cfr 基因在动物源细菌中传播的分子机制研究。以3年来分离获得的800余株氟苯尼考低敏感性畜禽源细菌为对象,调查了cfr 基因在上述细菌中的流行现状,测定了cfr携带菌株对常用抗菌药物的敏感性,分析了cfr携带菌株的分子流行特征,阐明了cfr 基因在不同种属细菌中的传播扩散的分子机制。结果1)从我国山东、四川、北京等地畜禽中分离获得携带cfr基因的葡萄球菌54株、芽孢杆菌2株、溶酪大球菌2株、粪肠球菌1株、猪链球菌1株、嗜脚动物咸海鲜球菌1株、普通变形杆菌1株、大肠杆菌1株;2)首次从阿尔莱特萄球菌、腐生葡萄球菌和科氏葡萄球菌中检出cfr基因,首次从家禽源细菌中检出cfr基因,首次发现并命名了3个携带cfr基因的质粒(pSS-01, pSS-02和pSS-03)和介导其传播的插入序列IS256-like;3)首次从肠球菌中检cfr基因,且该基因的传播通过质粒和插入序列IS1216介导;4)首次发现IS256可能介导cfr基因在芽孢杆菌中的传播,在另一芽孢杆菌中发现并命名了新链霉素耐药基因aadY,其和cfr基因共存于小质粒(7.4kb);5)首次在猪链球菌中发现cfr基因,该基因通过质粒和课题组命名的新型插入序列(ISEnfa5)传播扩散; 6)首次从溶酪大球菌和咸海鲜球菌中发现cfr基因,在溶酪大球菌中发现葡萄球菌质粒pSS-03 说明cfr质粒能够在不同种属细菌间穿梭传播;7)首次在变形杆菌中发现cfr基因,且该基因在普通变形杆菌中传播由插入序列IS26介导;8)首次在大肠杆菌中发现cfr基因,且该基因在大肠杆菌中的传播通过质粒和插入序列IS26介导;9)受邀完成了cfr基因在革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌中传播的综述。