中文摘要：

近年来的研究表明，表观遗传调控异常是系统性红斑狼疮（SLE）CD4+ T细胞异常活化的关键所在。非编码RNA是目前表观遗传调控机制的研究热点，穹窿体RNA 2（vault RNA 2,VTRNA 2）是最新发现的存在于穹隆体中的非编码RNA。我们前期研究表明VTRNA 2异常高表达于活动性SLE患者CD4+ T细胞中，而且过表达VTRNA 2的CD4+ T细胞增殖活性及自身B细胞的IgG抗体产量增加；同时，VTRNA 2能产生类似于microRNA的调控小分子穹隆体RNA（svRNAs）。本项目拟在前期实验的基础上，探讨VTRNA 2在SLE CD4+ T细胞异常活化中的作用及其分子机制；进一步揭示外周血CD4+T细胞中最新发现的VTRNA 2表达增高在SLE发生发展中的作用。本项目将有助于进一步阐明SLE发病的分子机制，并为寻找与鉴定SLE 新的分子标记及治疗靶点提供理论依据。

结论摘要：

目的研究SLE患者B细胞VTRNA2-1表达是否异常，以及其在SLE患者B细胞异常活化中的作用和分子机制。方法略。结果与健康对照组相比，活动性和非活动性的SLE患者外周血B细胞VTRNA2-1的表达显著增高（P值分别为0.0062和0.0159），活动性和非活动性SLE患者之间差异无统计学意义。转染VTRNA2-1过表达质粒的B细胞与转染空白质粒的B细胞相比，凋亡无明显差异。用TLR9激动剂CpG 2006刺激转染质粒后24小时的B细胞，4天后收集细胞，流式细胞仪检测结果显示过表达VTRNA2-1的B细胞CD40、CD80和CD86的蛋白均较对照组明显增高，但CFSE荧光强度无明显差异。基因表达谱芯片结果显示，与对照组相比，转染VTRNA2-1质粒的B细胞中，表达上调2倍以上的基因有188个，表达下调2倍以上的基因172个，但还需要进一步的生物信息学分析找寻参与VTRNA2-1促进B细胞活化的相关基因。Western blot结果显示，在生物素标记的VTRNA2-1富集下来的B细胞胞浆蛋白中可以检测到PKR。结论VTRNA2-1在SLE患者外周血B细胞中存在着异常高表达。在健康对照外周血B细胞中，过表达VTRNA2-1对细胞凋亡无明显影响，对CpG 2006刺激后的细胞增殖亦无显著影响，但能增强CpG 2006对B细胞的活化作用，提示SLE患者B细胞中VTRNA2-1的高表达在B细胞的异常活化中起着重要作用。生物素标记的VTRNA2-1能将PKR免疫共沉淀下来，但VTRNA2-1是否通过PKR参与B细胞活化及SLE发病的分子机制有待进一步研究。论文1篇已投稿。会议壁报交流1次。