本项目建立了蛋白质的二维电泳高效率分离和增强化学发光成像的高灵敏度检测低丰度蛋白质的方法。主要研究内容有首先,研究了二维电泳非探针蛋白质自成像化学发光检测法,并证明了本法能够快速灵敏地获得人血清蛋白的信息。在此研究的基础上发展了利用高灵敏度化学发光探针进行直接化学发光成像分析研究,研究了传统金染以及金属离子络合物以及其他有机分子与二维电泳-化学发光成像技术联用的分析方案和分析特性,系统研究及筛选这些物质作为化学发光探针的分析特性、以及产生化学发光的机理,为新型化学发光成像技术的研究提供了理论基础和探索途径。从而建立了高灵敏度、适用于大多数蛋白质的通用化学发光成像分析方法。利用碳纳米管的堆积效应,本项目建立了一种在线富集高丰度蛋白质的方法,使得进入分离胶的其他蛋白质不受其干扰;使得蛋白条带更加细窄,提高了检测的分辨率,开辟了血清蛋白质分离检测的新途径。本项目达到了预期目标,其成果对利用二维电泳分离-化学发光成像检测低丰度蛋白质提供了高效、高灵敏度的分离以及检测手段。
英文主题词chemiluminescent image; 2D electrophoresis; protein; carbon nanotubes