中文摘要：

肿瘤坏死因子α(TNFα)主要是由巨噬细胞分泌的一种多功能细胞因子，过量的TNFα表达可以引起组织损伤、重症感染性休克、自身免疫性疾病、器官移植后免疫排斥反应等，往往症状凶险，治疗困难；阻断TNFα能显著的改善这些疾病的症状。本研究采用异核多维核磁共振(NMR)技术在蛋白质溶液三维空间结构的水平上研究TNFα与其单抗之间的相互作用，结合WAP和CSP两种方法确定蛋白质-配体结合位点，分析并确定该两种蛋白结合部位互补匹配的腔穴中的关键氨基酸残基，而后联合计算机辅助药物设计(CADD)方法中分子对接技术(docking)，建立一个能中和TNFα的寡肽库，并从中筛选到一至两种与天然TNFα具有高亲和力的寡肽，为今后向临床上提供能有效阻断TNFα活性的特异性拮抗剂以及进一步开展能中和TNFα分子的非肽类化学新药的研究奠定基础，也为免疫治疗学开展相似的免疫调节剂的研究提供理论依据和实践经验。

结论摘要：

肿瘤坏死因子α(TNFα)主要是由巨噬细胞分泌的一种多功能细胞因子，过量的TNFα表达可以引起组织损伤、重症感染性休克、自身免疫性疾病、器官移植后免疫排斥反应等，往往症状凶险，治疗困难；阻断TNFα能显著的改善这些疾病的症状。本研究拟采用抗体技术、核磁共振(NMR)技术和计算机辅助药物设计方法（CADD）来筛选能有效阻断TNFα活性的小分子拮抗剂。自研究开展至今，在以下三方面取得了进展1.获得了24株抗TNFα抗体，其中只有3株能阻断其细胞毒性；2.通过基因突变改造了3聚体的TNFα蛋白分子（分子量为5万多），期望克服技术瓶颈，制备出符合核磁共振测定要求的TNFα蛋白单体或双体分子；3.通过CADD中的对接技术获得一个300个小分子化合物的库，目前已从中粗筛到2个能竞争性抑制TNFα分子与其受体的结合的小分子拮抗剂。本研究的初步研究结果将为今后向临床上提供能有效阻断TNFα活性的特异性拮抗剂以及进一步开展能中和TNFα分子的非肽类化学新药的研究奠定基础，也为免疫治疗学开展相似的免疫调节剂的研究提供理论依据和实践经验。