本课题通过进行体内、外感染实验,结合研制筛选鱼类弹状病毒单克隆或中和抗体、运用免疫荧光技术和基因共定位技术,对鱼类弹状病毒 (SCRV) N基因 和 G 的表达、细胞内定位、免疫原性及诱导鱼类机体或细胞产生抗病毒保护作用进行了研究。构建了含SCRV N基因 (pcDNA-N) 和G基因 (pcDNA-G)的质粒 DNAs。通过鱼体攻毒、免疫组化及半定量RT-PCR等方法,对所构建的SCRV的 G基因和N基因 DNA疫苗的免疫保护率、免疫鱼组织细胞病变情况及几个免疫相关基因的表达进行了测试分析。结果显示 pcDNA-G 的相对保护率为77.5%,但 pcDNA-N 的相对保护率仅为2.5%。免疫组化分析显示经 pcDNA-G 免疫保护,SCRV对感染鱼的肾、肝、脾、腮和心组织的损伤较小。基因转录分析进一步揭示, 当鱼体注射pcDNA-G之后,其组织中的免疫相关基因IRF-7、Mx、Viperin不同程度上调表达, 而免疫球蛋白M (IgM) 基因没有明显变化。揭示含有鳜鱼弹状病毒糖蛋白基因的质粒DNA快速启动了鱼体I型干扰素抗病毒免疫应答途径。
英文主题词Fish viral disease; Rhabdovirus; Nucleoprotein; Immunogenicity; Antiviral immune response