利用分散细胞移植和分子生物学技术对鸟类体节中胚层细胞的体节细胞决定的机制和相关基因的表达和功能进行了研究。1利用RDA和减法杂交技术,较系统地分析和克隆与体节细胞决定相关的基因及其表达图式; 2利用体节细胞的标志基因、分散细胞移植和胚胎切割技术,研究相关基因与细胞决定或细胞分化发育能力的相关性。结果1 克隆到与体轴、体节形成重要相关的Shh和Paraxis cDNA全长基因,与GenBank序列比对同源性达到98%(Paraxis)和99.5%(Shh)。2分散细胞移植和胚胎中轴切割实验证明,前体节中胚层细胞的命运在亨氏结已初步决定,在失去有序的诱导信号下,只能形成初级体节而不能进一步分化和迁移。3 鸡胚原位杂交实验表明,Shh侧重于外胚层系衍生的组织表达;而Paraxis侧重于中胚层系衍生的组织中表达。并非仅限于中轴结构的特异表达。说明这些基因在器官形成期的作用是基本的、胚层系特异的表达。4 胚轴切割RT-PCR实验结果提示,Shh是以蛋白扩散形式对体节的形成产生作用;而Paraxis则在体节板和第36体节以内检测到基因表达,其表达水平在36体节以后消失。
英文主题词somatic mesoderm; cell decisions; gene expression; dispersed cell transplantation; in situ hybridization