中文摘要：

骨生成诱导因子（OIF）是一种功能尚不明确的分泌蛋白，我们已发现该基因在小鼠肾上腺皮质束状带表达较高，应激后表达降低；且证实ACTH抑制但地塞米松促进肾上腺OIF的表达。这与肾上腺糖皮质激素受ACTH与地塞米松的双重调控类似，提示OIF可能与糖皮质激素的调控存在联系。腹腔注射OIF蛋白引起小鼠血皮质酮水平显著升高，OIF蛋白同样促进了体外培养的肾上腺细胞糖皮质激素的合成分泌，证实了OIF对糖皮质激素的调控作用。令人惊喜的是，我们还发现OIF对糖皮质激素的促进并非通过STAR等其合成酶表达增加而实现，且发现OIF-/-小鼠肾上腺脂滴沉积显著增加，促进胆固醇从胞内流出的关键基因ABCA1的表达显著降低，提示OIF可能通过影响肾上腺细胞内糖皮质激素合成原料的平衡而对其产生调控作用。本课题即从体内外两方面研究OIF对肾上腺细胞内胆固醇平衡的影响及其分子机制，拓展人们对肾上腺生理功能的认识。

结论摘要：

摘要OIF是一种新的功能尚不明确的分泌蛋白，已有的研究表明，它在多种物种中高度保守，并广泛参与细胞的增殖和分化，均提示它具有很重要的生理功能。我们前期的研究发现OIF 在肾上腺高表达，同时又受ACTH 及地塞米松双向调控。本课题研究发现1）使用OIF蛋白腹腔注射小鼠后，发现小鼠血中皮质酮的浓度明显升高。2）饥饿应激处理后，WT鼠和OIF-/-鼠两组间血清皮质酮的水平没有明显差异，但WT鼠血浆ACTH的浓度却显著高于OIF-/-鼠。注射CRH后，WT鼠和OIF-/-鼠血皮质酮的水平没有明显差异,在注射CRH后25min时，WT鼠血ACTH水平显著高于OIF-/-鼠;注射ACTH后，WT鼠和OIF-/-鼠血皮质酮水平无差异;注射DEX后，OIF-/-鼠的血皮质酮较WT鼠受DEX抑制的程度更明显，而ACTH的受抑制的程度无明显差异。3）MBP-OIF腹腔注射后，小鼠肾上腺STAR、CYP11A1、CYP11B1、CYP21的表达下降， 而SR-B1表达升高。4）OIF基因敲除鼠肾上腺细胞内脂滴沉积增加，OIF基因敲除鼠原代培养观察到，肾上腺3H胆固醇的流入较野生型增加，流出未见明显变化。5）不同剂量的OIF加入Y-1肾上腺细胞培液中，观察到OIF促进了细胞内3H胆固醇的内流，同时增加了皮质酮的分泌,SR-B1的表达升高。6）相对于空转细胞,OIF稳定转染的Y-1细胞培液中皮质酮的浓度升高，稳转细胞培养36h后，细胞胆固醇流入增加，流出未见明显变化,SR-B1表达升高。7）在OIF RNA干扰的Y-1细胞上，发现在干扰24h后细胞培液中皮质酮的浓度下降，SR-B1表达下降。上述结果证实了OIF蛋白参与了肾上腺细胞内脂质代谢，对肾上腺细胞内胆固醇的平衡以及体内糖皮质激素的水平具有重要的调节作用。这拓展了人们对肾上腺的生理功能及调控机制的认识，并为病理性的肾上腺发育不良、增生、应激过度或应激不全等提供了新的治疗靶点。