肿瘤干细胞是恶性肿瘤发生,发展和转移的核心。本研究以腺样囊性癌作为研究对象,以血道肺转移成瘤为筛选标准,通过单个细胞微分析的技术手段,分离腺样囊性癌肿瘤干细胞,完成肿瘤干细胞和成体肿瘤细胞的差异分析,对相关的功能基因及其蛋白质进行分析,试图揭示肿瘤干细胞的分化成瘤相关机制,为下一步针对肿瘤干细胞的治疗提供平台。
肿瘤细胞与干细胞具有相似的生物学特性,那么肿瘤中是否存在有干细胞,其特性如何?对肿瘤干细胞的分离及其特性的研究,将有助于设计更加准确和有效的肿瘤临床治疗策略。本实验采用单细胞体外培养法、免疫组化、免疫磁珠细胞分离技术、动物成瘤试验和基因芯片技术,对ACC-2肿瘤细胞株中不同表型的肿瘤细胞的表型和基因差异进行了系统的研究。ACC-2单细胞仅有4.5%可以持续分裂、增殖,细胞表面抗原为cd44+cd24-的肿瘤细胞较未分离的ACC-2肿瘤细胞具有更强的增殖能力;cd44+cd24-肿瘤细胞具有分化为其它表型肿瘤细胞的能力。未分离的ACC-2肿瘤细胞与cd44+cd24-ACC-2肿瘤细胞在502个与细胞分化、凋亡、粘连、信号传导等有关的基因上存在差异。ACC-2肿瘤细胞的增殖能力源于cd44+cd24-ACC-2肿瘤细胞亚群的增殖能力。上述结果提示ACC-2中存在有肿瘤干细胞,而cd44+cd24-是ACC-2肿瘤干细胞必须兼备的表面标志。而在永生化的肿瘤细胞系中获得的干细胞存在的证据,不仅为肿瘤中干细胞的存在提供了新的依据,而且以干细胞理论阐明了肿瘤细胞系传代的基础及特点。