在国家基金(30970090)资助下,构建了N. sylviforme紫杉醇产生菌紫杉醇合成期消减非合成期cDNA文库、高比例全长cDNA文库和高效遗传转化体系,分离到了6个内生真菌紫杉醇合成相关基因。本研究在以前工作基础上,构建N. sylviforme高产紫杉醇菌株HDFS4-26(产量516.37微克/升)紫杉醇生物合成相关基因打靶载体,并利用根癌农杆菌介导(ATMT)对前期已获得的侯选基因打靶,进一步筛选N. sylviforme紫杉醇产生菌紫杉醇生物合成相关基因;采用染色体步移获得高产紫杉醇菌株HDFS4-26紫杉醇合成的基因簇,并验证其功能。该研究将为阐明内生真菌紫杉醇生物合成途径和解析其生物合成机制奠定基础。
英文主题词endophytic fungi;taxol;gene target;high-throughput sequencing;related gene