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定位于着丝粒的新发现蛋白F46ag的基因克隆和功能分析
  • 项目名称:定位于着丝粒的新发现蛋白F46ag的基因克隆和功能分析
  • 项目类别:面上项目
  • 批准号:30470875
  • 申请代码:C0702
  • 项目来源:国家自然科学基金
  • 研究期限:2005-01-01-2007-12-31
  • 项目负责人:梁前进
  • 负责人职称:副教授
  • 依托单位:北京师范大学
  • 批准年度:2004
中文摘要:

本项目组研究发现一例进行性系统性硬皮病自身免疫血清(F46)的抗原定位于着丝粒,是单一分子量的蛋白F46ag(在HeLa细胞和印度麂培养细胞IM中分别是65kd和67kd);并发现尽管迄今被命名的Cenps已至少有9种,但单环刺螠(Urechis unicinctus)中只检测到F46ag和CenpG,而缺乏可被别的抗血清(ACAs)识别的Cenps,具有简单性。单环刺螠是中国北方沿海常见的螠虫动物,雌雄异体、产卵量大、受精条件简单且受精率高。鉴于着丝粒在染色体结构、功能和细胞分裂中特殊的重要地位,基于F46ag的特异性存在,本研究利用单环刺螠,通过免疫沉淀、双向电泳、微量蛋白测序和cDNA文库筛选等进行F46ag的基因克隆和序列分析;用重组DNA技术、PCR、RNAi、显微细胞化学和免疫印迹等技术研究其功能,特别是与细胞增殖调控及分化等的关系。这一研究具有重要的分子细胞生物学和进化意义。

结论摘要:

本项目组研究发现一例进行性系统性硬皮病自身免疫血清(F46)的抗原定位于着丝粒,是单一分子量的蛋白F46ag。本项目以克隆和研究新基因为目标,探讨了F46ag的亚细胞定位和功能,发现存它在癌细胞凋亡中的表达呈上升趋势,在神经细胞分化中有亚细胞分布变化。在相关基因克隆分析中,确定了两个新的目标蛋白- - F46ag-T1和CrpF46(F46ag-T2),它们的共同点是在中心体上的定位,均与细胞增殖中纺锤体形成、正常胞质分裂等相关,都可能受磷酸化调节;不同的是前者属于纺锤体结合蛋白,在M期定位于纺锤体和中心体,后者是特异的间期中心体蛋白。项目的核心工作集中在这两个蛋白的性质和功能研究中。此外,在着丝粒、中心体和细胞增殖调控的其他方面也有一些研究进展。在表观遗传修饰研究方面,发现H3-Lys27和H3-Lys9甲基化与X染色体失活解偶联的现象。


成果综合统计
成果类型
数量
  • 期刊论文
  • 会议论文
  • 专利
  • 获奖
  • 著作
  • 17
  • 9
  • 0
  • 0
  • 0
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