本项目组研究发现一例进行性系统性硬皮病自身免疫血清(F46)的抗原定位于着丝粒,是单一分子量的蛋白F46ag(在HeLa细胞和印度麂培养细胞IM中分别是65kd和67kd);并发现尽管迄今被命名的Cenps已至少有9种,但单环刺螠(Urechis unicinctus)中只检测到F46ag和CenpG,而缺乏可被别的抗血清(ACAs)识别的Cenps,具有简单性。单环刺螠是中国北方沿海常见的螠虫动物,雌雄异体、产卵量大、受精条件简单且受精率高。鉴于着丝粒在染色体结构、功能和细胞分裂中特殊的重要地位,基于F46ag的特异性存在,本研究利用单环刺螠,通过免疫沉淀、双向电泳、微量蛋白测序和cDNA文库筛选等进行F46ag的基因克隆和序列分析;用重组DNA技术、PCR、RNAi、显微细胞化学和免疫印迹等技术研究其功能,特别是与细胞增殖调控及分化等的关系。这一研究具有重要的分子细胞生物学和进化意义。
本项目组研究发现一例进行性系统性硬皮病自身免疫血清(F46)的抗原定位于着丝粒,是单一分子量的蛋白F46ag。本项目以克隆和研究新基因为目标,探讨了F46ag的亚细胞定位和功能,发现存它在癌细胞凋亡中的表达呈上升趋势,在神经细胞分化中有亚细胞分布变化。在相关基因克隆分析中,确定了两个新的目标蛋白- - F46ag-T1和CrpF46(F46ag-T2),它们的共同点是在中心体上的定位,均与细胞增殖中纺锤体形成、正常胞质分裂等相关,都可能受磷酸化调节;不同的是前者属于纺锤体结合蛋白,在M期定位于纺锤体和中心体,后者是特异的间期中心体蛋白。项目的核心工作集中在这两个蛋白的性质和功能研究中。此外,在着丝粒、中心体和细胞增殖调控的其他方面也有一些研究进展。在表观遗传修饰研究方面,发现H3-Lys27和H3-Lys9甲基化与X染色体失活解偶联的现象。