中文摘要：

p120是连环素家族成员，在胞膜上与上皮钙粘蛋白结合介导细胞间粘附，在胞质中通过激活RhoGTP酶家族成员调节细胞极性形成和迁移。最早有人在炎症性肠病中发现p120表达缺失。最近证实，定向敲除p120可通过活化NF-κB引起表皮及涎腺组织的炎症反应，但其中的确切机制并未阐明。我们近期实验也发现用LPS刺激或siRNA敲低培养气道上皮细胞p120后，NF-κB活性增强，IL-8表达增加。提示，p120可能通过NF-κB调控气道炎症反应。本项目在原有工作基础上，拟采用脂多糖、香烟烟雾和甲醛等建立体内外气道上皮损伤模型，深入研究不同因素作用下气道上皮p120的表达和定位、磷酸化状态，NF-κB活性变化及相关细胞因子的表达；以及干预p120功能活性对气道炎症反应的影响，并初步探讨其中的机制。这将有助于阐明气道上皮损伤修复及炎症慢性化的分子机制，以期为COPD气道炎症反应的防治提供新的靶点。

结论摘要：

p120-catenin(p120)是连环素家族成员，在细胞膜上与上皮钙粘蛋白相互结合而调节细胞粘附，在胞质中通过激活Rho GTP酶家族成员调节细胞极性形成和细胞迁移。最早有人在炎症性肠病中发现p120表达缺失。近年来有研究表明，p120通过调节NF-κB活性参与表皮炎症反应，但其中的确切机制并未阐明。本项目通过脂多糖、机械划伤和香烟烟雾等建立体内外气道上皮炎症反应模型，探讨p120是否参与调控炎症反应及可能的分子机制。体内建立小鼠肺损伤模型，通过形态学观察、免疫组化染色、Western blot、ELISA等方法检测发现，p120蛋白表达水平下调，同时IκBa磷酸化及NF-κB p65转位入核，而且NF-κB信号途径下游靶基因——前炎症因子IL-8表达增多，提示p120下降活化NF-κB参与了气道上皮炎症反应。随后，体外刺激培养的人气道上皮细胞建立气道上皮损伤反应模型，运用细胞核及浆分离提取技术、Western blot、 RT-PCR、免疫共沉淀、G-LISA、转染、干扰等方法研究发现， 与体内结果一致，p120表达下调活化NF-κB信号通路引起气道炎症反应; 更为重要的是，在气道上皮细胞中我们首次发现RhoA与p120互相结合。脂多糖、机械划伤刺激气道上皮后，虽然RhoA总蛋白改变不明显，但G-LISA检测发现RhoA活性较未给予刺激前显著上升。运用抑制剂Y27632抑制RhoA活性后，NF-κBp65入核被部分抑制。外源性p120过表达不活化RhoA与NF-κB，但损伤因子刺激后，RhoA活性升高水平有所下降，而且，p120敲低后RhoA活性显著上升，NF-κB p65转位入核， IL-8的表达水平增加。结果表明，气道炎症反应中，p120可能通过RhoA实现对 NF-κB信号通路的调控。这将为深入探讨气道炎症的发生发展机制提供理论与实验依据。