中文摘要：

本项目主要对木霉Swollenin在纤维素水解过程中的作用机制展开研究。首先构建了黑曲霉外源蛋白表达体系，将拟康氏木霉Swollenin（SWO2）全蛋白基因连接到带有多克隆位点的黑曲霉通用表达质粒，转化黑曲霉MGG029原生质体，获得了SWO2表达量较高且能够稳定表达的重组菌株。根据SWO2保守结构域的分析，构建并获得了△CBD-Linker，△Pollen allergen，△FnⅢ结构域缺失突变体的表达菌株。从重组菌株发酵液中分离纯化了重组SWO2蛋白并对其活性进行了分析。结果表明，SWO2有微弱的葡聚糖酶活性，可作用于微晶纤维素Avicel (PH101)，CMC和磷酸膨胀纤维素RAC，产物为二糖、三糖和四糖。在低纤维素酶剂量（0.08~0.09 FPU/g纤维素）条件下，采用SWO2与纤维素酶同时处理和先SWO2后纤维素酶顺序处理的结果表明，Swollenin与纤维素酶在微晶纤维素Avicel的降解中协同作用明显，同时处理的最大协同活性可达16%，经SWO2与纤维素酶顺序作用时，最大协同活性可达到27%。这一结果表明Swollenin可能参与丝状真菌对纤维素降解的初始阶段。