育龄夫妇中15%受不育症困扰,其中男方因素占50%。近年来人们逐渐认识到细胞因子在睾丸精子发生过程中扮演着重要角色。尽管某些细胞因子能够调控精子发生过程,但是由于缺乏组织特异性,尤其是睾丸组织特异性,使其进一步临床应用研究受到限制。我们前期研究发现,新的细胞因子CKLFSF2特异性高表达于睾丸组织,其在不育症患者和正常睾丸中存在明显差异表达,即生精功能越差CKLFSF2表达越低。我们推论,CKLFSF2可能对睾丸精子发生功能具有调控功能,CKLFSF2表达异常可能导致睾丸精子发生障碍。本课题将利用精曲小管离体培养、基因转染、精曲小管内显微注射、构建不育症动物模型等技术研究CKLFSF2在睾丸精子发生过程的可能作用及其分子生物学机制,探索CKLFSF2与精子发生障碍的相关性,为不育症诊断与治疗的基础研究和临床应用提供新的理论依据。
趋化素样因子超家族成员2(CKLFSF2)属于趋化素样因子超家族,在前期的研究中发现,CKLFSF2表达于曲细精管中,表明它可能在男性生殖细胞发育过程中发挥一定的作用。在本课题中,我们利用免疫组织化学、原位杂交,RT-PCR、免疫组化和免疫电镜,以及细胞培养和动物实验等方法,研究了CKLFSF2在生精上皮中的具体表达定位,CKLFSF2的表达与男性不育症的联系及CKLFSF2在精子发生过程中的可能作用。此外,我们还对小鼠的两个同源序列cklfsf2a&2b的表达和定位及在生精中的作用进行了研究。研究发现CKLFSF2表达于减数分裂期及以后各级生殖细胞中,并且定位在内质网和胞质内转运囊泡膜上。在不育患者中具有明显差异表达,其基因和蛋白表达量随着不育程度的加深而减少。两个同源序列同样在精子发生中发挥作用。研究结果表明,CKLFSF2作为一个生殖细胞的膜蛋白分子,可能通过参与构成生殖细胞内的转运囊泡,调控减数分裂、顶体形成以及精子形成和释放等精子发生过程,对生殖细胞的发育和分化发挥重要作用。此外,CKLFSF2和男性不育症的发生存在紧密联系,将来可能成为男性不育症诊断和治疗的新靶点。