中文摘要：

DRG的持续受压(CCD)可以产生异常疼痛，并伴有神经元的自发性放电增加。我们研究发现CCD导致的机械性异常疼痛与TRPV4的表达有关,且TRPV4-NO-cGMP-PKG通路参与CCD后DRG的痛敏作用。但TRPV4-NO的具体机制不清楚。NO已经被证实是参与伤害性疼痛的重要介质，受到转录因子NF-κB 的调控，且与钙内流有关。cAMP-PKA和cGMP-PKG可以引起CCD大鼠的热痛敏，但对正常大鼠则无效。只有当cAMP达到足够的浓度，PGE2导致的机械痛敏才转变为TRPV4依赖性。而且TRPV4是神经元兴奋性的重要的调节因素。因此，我们猜测①TRPV4-NO-cGMP-PKG通路可能是通过钙内流激活NF-κB，释放NOS，从而参与痛觉信号传递。②TRPV4参与CCD后DRG异常放电。我们拟采用膜片钳、激光共聚焦、流式细胞技术、siRNA及PCR扩增等技术研究上述痛觉过敏通路的机制。

结论摘要：

本研究课题成功构建了大鼠背根神经节受损的动物模型(CCD模型)，鞘内注射TRPV4siRNA、NF-kB两种特异性阻断剂以及腹腔注射钙通道阻断剂后，采用RNAi、免疫荧光、Western blotting、RT-PCR、激光共聚焦、EMSA等技术发现TRPV4siRNA可降低CCD大鼠TRPV4的表达、减少细胞内Ca2+浓度、抑制NF-kB活性以及NO含量；NF-kB两种特异性阻断剂可降低NF-kB以及NO含量；钙通道阻断剂可降低细胞内Ca2+浓度、NF-kB活性以及NO含量。且这些改变均可部分逆转CCD后大鼠的热痛敏。利用在体神经纤维电生理技术记录大鼠背根神经节(DRG)持续受压后的异位放电情况，发现CCD后受损DRG可出现异位放电，阻断TRPV4可降低DRG异常放电频率和波幅，激活TRPV4可明显增加该异常放电。结论①TRPV4-NO通路是通过钙内流激活NF-κB，释放NOS，从而参与痛觉信号传递。②TRPV4参与CCD后DRG异常放电。