Dickeya zeae菌株EC1是自广东水稻基腐病组织分离的一株致病菌,可产生抑制水稻种子萌发的毒素。研究证明,该毒素为聚酮多胺类抗生素,其中zeamine(C49H105O4N6)占EC1产毒量的60%,zeamineⅡ(C40H88ON5)占40%。在前期研究中,我们通过Tn5转座子插入突变、TAIL-PCR扩增及测序,克隆分析了一个聚酮合成酶编码基因zmsA,基因敲除证明ZmsA参与zeamine的生物合成,另外还获得了近20个毒素产生明显减少的Tn5插入突变体。本课题拟用hiTAIL-PCR方法结合基因组测序结果,对突变体进行分子鉴定,用生物信息学方法对克隆的基因进行功能预测,用基因敲除、功能互补及中间产物分析手段进行功能验证,以揭示这些基因在zeamine生物合成及致病过程中的作用。研究结果可为合成生物学提供线索,通过对结构基因等的改造提高zeamine产量或产生新的衍生物。
英文主题词Dickeya zeae;zeamines;gene cluster;sequence;function