中文摘要：

搞清肾综合征出血热（HFRS）患者常见HLAⅠ类分子限制的汉滩病毒核蛋白（HTNV-NP）杀伤性T细胞（CTL）表位。应用51Cr杀伤试验、酶联免疫斑点试验（ELISPOT）和四聚体（tetramer）技术，探讨不同HLA基因型特异性CTL杀伤水平和频率的变化规律，及其与HFRS不同病程和病情的关系。从而阐明HTNV-NP特异性CTL的应答规律，及其与HTNV感染后免疫保护或免疫损伤的关系，为基因疫苗和分子疫苗的设计，以及制订新的临床治疗策略提供新的理论依据。

结论摘要：

T细胞应答在抗病毒免疫中起着重要的作用，但目前对汉滩病毒(HTNV)特异的CD4+和CD8+T细胞表位尚不十分清楚。因此，我们首先用HTNV核蛋白部分重叠肽刺激HFRS患者PBMC，用ELISPOT鉴定出了23个HTNV-NP特异的15肽T细胞表位。再用免疫磁珠去除患者PBMC中的CD4+或CD8+T细胞，用ELISPOT证实其中14种15肽中仅含有CTL表位，3种15肽中仅含有CD4+T细胞表位，而5种15肽中同时含有CTL表位和CD4+T细胞表位。在19种含有CTL表位的15肽中，预测合成了54条9肽，其中8种15肽中的13种9肽已被证实为CTL表位。最后，用经照射的、15肽或9肽加载过的CD4-CD8-PBMC刺激磁珠分离的CD4+或CD8+T细胞，建立T细胞系作为效应细胞，同时以HLA等位基因部分相配的B-LCL细胞作为APC,用ELISPOT确定T细胞表位的HLA限制性。结果表明P41-5、P33-6、P43-6特异的CTL应答分别受HLA-A24、A11和B7的限制。T细胞表位的鉴定将为探讨HTNV 特异性T细胞免疫应答规律及其多肽疫苗的设计提供理论依据。