丝氨酸蛋白酶(Serine protease, SP)是先天免疫过程中重要的多功能蛋白酶类,目前对蟹类丝氨酸蛋白酶功能的报道尚少,其相关调控机制的研究几乎空白。本项目在前期获得三疣梭子蟹4种SP亚型(PtcSP1-3, PtncSP)基础上,应用实时定量PCR、蛋白重组、Western blot、免疫组化等技术,分析不同亚型的重组蛋白功能,阐明它们在三疣梭子蟹雌体交配前后和产卵前后的时空表达规律;同时应用RNAi技术,分析这些亚型被干扰后血淋巴中酚氧化酶活性、血淋巴凝结速度和相关调控基因(抗菌肽、丝氨酸蛋白酶同源物及其抑制剂)表达的变化,初步阐明丝氨酸蛋白酶的调控机制。本项目将填补蟹类不同发育阶段丝氨酸蛋白酶研究的空白,为深入理解雌蟹重要生理过程的免疫力变化提供参考;为全面理解丝氨酸蛋白酶功能的多样性奠定基础,对揭示甲壳动物免疫防御机制具有重要意义,也将为蟹病防治提供新思路、新方法。
英文主题词Portunus trituberculatus;Serine protease;Gene isoform;Immunity;