猪传染性胸膜肺炎是全球性严重危害养猪业的呼吸道疾病,胸膜肺炎放线杆菌(APP)是该病的病原体。迄今已发现APP15个血清型,主要血清型间没有交叉免疫保护,导致疫苗研究进展十分缓慢,寻找不同血清型特异的保护性基因,成为研制多价疫苗的一个瓶颈。本课题以APP国内主要血清型1型和3型参考株为研究对象,采用代表性差异分析(RDA)技术,构建基因组差减文库和cDNA差减文库,获得了APP血清1 型11条差异基因、22 条差异表达基因,APP血清3 型8条差异基因、20 条差异表达基因,对获得的差异表达基因进行核糖体展示,经免疫筛选和RT-PCR扩增后,获得了APP血清1型11条、血清3型6条免疫相关基因;对筛选的自转运黏附素和ClpP蛋白酶进行原核表达,发现二者具有一定的免疫保护作用,自转运黏附素具有粘附活性。本研究结果为今后致病机理、新型多价疫苗研究以及特异性分子诊断技术的建立提供必要的基因基础,并提供系统筛选候选抗原基因的良好平台。
英文主题词Actinobacillus pleuropneumoniae; different gene libraries; vaccine candidate gene