中文摘要：

NRCF是周围神经再生的一个重要微环境，在以往研究中，本课题组证实，除NT-4外，NRCF中200KD左右蛋白带，可能含有一新的尚未知的神经生长因子。在本项目研究中，拟进一步应用色-质谱分析仪，对目标蛋白带各成份进行分析检测，以明确可能的含有蛋白的种类和分子量、分子结构，并通过PAGE电泳的神经节神经植块培养，和western blot+培养的细胞钩蛋白带法，确认具有神经活性的蛋白。根据这一活性蛋白的分子量与结构，明确是否为一新的尚未知的神经活性因子。神经生长调节因子，是神经再生机制表达的关键，这一领域研究的新的发现，对于人类掌握神经再生规律有着重要的意义。

结论摘要：

研究目的是对NRCF中232-440 kDa蛋白条带进行分离和定性，明确其中具有趋化活性的成分。首先建立了兔坐骨神经再生室模型，采集NRCF进行自然胶电泳分离。结果显示在232-440kDa间有一蛋白条带。切取该蛋白条带，采用鸟枪（Shotgun）蛋白质组学策略对蛋白质进行鉴定。质谱分析该条带鉴定出54种蛋白，检索明确其中不存在已知的神经生长因子。应用功能域筛选发现一蛋白具类补体C3结构，暂定为C3样因子，其C末端和神经突起生长因子Netrin的C末端同样存在NTR组件。在培养的鼠大脑皮层神经元中加入外源性C3蛋白，检测其对神经元的活力影响，免疫细胞化学对神经元树突和轴突然色，应用神经元形态分析软件对神经元突起长度进行统计分析。发现低剂量(1-5μg/ml )C3对神经元存活率与对照组无差异，但明显增加鼠大脑皮层神经元轴突和树突长度，并且C3a受体拮抗剂SB290157拮抗C3的促突起增长。本试验首次证实补体C3具有促神经轴突突起作用，提示C3a可能通过其受体C3aR促进神经细胞突起生长，并明确NRCF中存在C3样神经生长因子，作为一原创性的发现，具有十分重要的科学价值。