piggyBac是目前转基因昆虫研究中最有应用前景的转座子载体,利用piggyBac作为载体的转基因棉红铃虫是目前唯一获准登记用于田间释放试验的转基因农业害虫。本项目首先利用分子生物学方法获得了棉红铃虫内源性piggyBac类转座子PgPLE1全长序列、多个拷贝序列及旁侧序列,随后通过RT-PCR和vectorette PCR证实了PgPLE1具有转录和转座活性。在此基础上,与Yoonseong Park博士合作,利用vectorette PCR和Sounthern杂交进行了PgPLE1种群插入多态性检测,发现种群间个体存在较大的插入位点变异,并且在棉红铃虫近似种Pectinophora endema基因组中未检测到PgPLE1的存在。进一步通过特异性PCR检测了PgPLE1 的5个拷贝在多个地理种群中的插入位点基因频率,发现地理种群间存在一定的遗传分化。项目组较好地完成了计划任务,发现PgPLE1通过水平转移进入棉红铃虫基因组是一个近期事件,初步证实PgPLE1具有转录和转座活性,并且转座子插入多态性可用于昆虫种群遗传分化研究,推动了piggyBac领域的进一步深入研究。
英文主题词Pectinophora gossypiella;piggyBac-like element; transcription and transposition activity;insertion polymorphism;population genetic structure