中文摘要：

我们以往的研究发现，作为PPARα激活物的非诺贝特和不饱和脂肪酸对PAI-1表达的影响截然不同，提示可能涉及不同的(或多个)细胞内信息转导通路，但至今尚无类似的研究报道。本课题采用分子生物学和细胞生物学方法，以探讨非诺贝特影响PAI-1表达和活性的分子机制为主导，从比较非诺贝特和亚麻酸影响PAI-1表达在PAI-1启动子作用部位的异同和相互关系入手，探索其可能涉及的信息转导通路，并利用共转染PPA

结论摘要：

体外培养HepG2细胞，以不同浓度非诺贝特和亚油酸诱导，二者均能剂量相关性影响PAI-1及PPARαmRNA的表达，且作用方向不完全一致。构建由PAI-1启动子全长序列及该区域内不同长度片段控制表达的基因重组质粒，体外转染HepG2细胞，非诺贝特和亚油酸均可从转录水平影响PAI-1表达，非诺贝特为抑制，亚油酸为增强。共转染PPARα质粒后二者对PAI-1转录活性的作用进一步增强。在PAI-1启动子区域内可能分别存在非诺贝特和亚油酸调控PAI-1转录的序列，考虑此序列与Smad结合元件（SBE）有关。构建PAI-1启动子上三个SBE元件定点突变缺失体重组质粒，分别转染HepG2细胞,观察不同因素诱导下PAI-1转录活性变化；检测非诺贝特和亚油酸诱导下HepG2细胞中Smad3、4蛋白水平。PAI-1启动子上不同位置的SBE在非诺贝特和亚油酸对PAI-1基因表达过程中发挥不同的转录调控作用，非诺贝特可显著抑制Smad3、4的蛋白表达，而亚油酸作用相反。提示非诺贝特和亚油酸对HepG2细胞中PAI-1基因的转录调控均涉及到Smads蛋白及其介导的Smad信号转导通路，国内外尚未见到相关报道。