利用基因工程技术制备由HIV gp120 C2-C4区与人TGF-β的功能域构成的重组蛋白pGT,能靶向人CD4+ CD25- T细胞并促进其Treg化。结果①克隆了HIV gp120 的C2-C4区和人TGF-β的功能区,连接两片段获得编码pGT的重组基因并连入pET28a载体。②37℃在0.1 mmol/L IPTG浓度下诱导6h获得优化的表达效率,蛋白表达形式为包涵体。③获得优化的重组蛋白复性条件。④重组蛋白特异性识别人CD4并具有TGF-β的生物活性,体外可促进CD4+ CD25- T细胞Treg化。意义①发明了一种新型的重组蛋白pGT并优化了其生产工艺,该重组蛋白较天然TGF-β相比具有选择性作用于CD4+ T细胞的优点;②推出了新型的CD4靶向分子HIV gp120 C2-C4,扩大了原来的研究视野;③验证了原标书的设想,达到了促进CD4+ CD25- naive T细胞Treg化的目的。
英文主题词DNA recombinant technology; CD4+CD25- na?ve T cell; regulatory T cell; Molcular trageting; recombinant protein