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应用RNAi技术研究锯缘青蟹雄性特异性抗菌肽Scygonadin基因的功能
  • 项目名称:应用RNAi技术研究锯缘青蟹雄性特异性抗菌肽Scygonadin基因的功能
  • 项目类别:青年科学基金项目
  • 批准号:30700625
  • 申请代码:C190601
  • 项目来源:国家自然科学基金
  • 研究期限:2008-01-01-2010-12-31
  • 项目负责人:黄文树
  • 负责人职称:副教授
  • 依托单位:集美大学
  • 批准年度:2007
中文摘要:

Scygonadin是从我国重要经济海水养殖种类- - 锯缘青蟹精浆中分离获得的一种新抗菌肽,在锯缘青蟹雄性生殖系统中特异性转录表达,可能具有生殖免疫功能,阐明其生物学功能具有重要的科学意义和应用前景。项目比较了三种siRNA在活体中敲减Scygonadin基因的效果,并进一步研究其中二种siRNA在活体中敲减该基因的剂量及持续敲减时间,结果发现,高剂量组dsScy295(10 ug/g)可有效地敲减性成熟雄性青蟹体内的Scygonadin基因,且仅能维持4天;为了持久敲减该基因,项目组在体外构建pCMV-Scy-SH表达载体,活体中评估其基因敲减效果。为了掌握最佳基因敲减时机,研究发现人工病原细菌和真菌感染等刺激无法诱导Scygonadin基因上调表达;Scygonadin转录子从雄性通过交配转移到雌性青蟹体内,并可持续到早期胚胎发育阶段。综上,项目组实现了活体内有效敲减Scygonadin基因,并再次证实了Scygonadin在维护青蟹的亲体健康以及早期胎胚发育等青蟹繁育过程中起重要作用。

结论摘要:

英文主题词Scygonadin;antimicrobial peptide;siRNA; reproductive tract


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