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2,5二酮基-D-葡萄糖酸还原酶基因克隆与表达研究
  • 项目名称:2,5二酮基-D-葡萄糖酸还原酶基因克隆与表达研究
  • 项目类别:面上项目
  • 批准号:39770021
  • 申请代码:C010301
  • 项目来源:国家自然科学基金
  • 研究期限:1998-01-01-2000-12-01
  • 项目负责人:尹光琳
  • 负责人职称:研究员
  • 依托单位:上海中科伍佰豪生物工程有限公司
  • 批准年度:1997
中文摘要:

通过多年的研究已完成项目预期目标。从棒状杆菌SCB3058中克隆得到两个2,5-二酮基-D-葡萄糖酸(2,-5-DKG)还原酶Ⅰ和Ⅱ基因,经大肠杆菌表达得到高活力的酶蛋白。在此基础上实现了在欧文氏菌SCB125中的表达和优化,在5升自控罐中实现了从葡萄糖一步发酵产生维生素C前体2-酮基-L-古龙酸(2-KLG)。研究过程中发现在欧文氏菌SCB125中存在两个2-酮基醛糖还原酶(2-KR),严重影响目的产物2-KLG的产生和积累。PCR扩增得到两个长度约1Kb的2-KR基因(tkrA和tkrB),开展了欧文氏菌SCB125中敲除tkrA和tkrB的工作,已获得一株敲除了tkrA基因的SCB125菌株。


成果综合统计
成果类型
数量
  • 期刊论文
  • 会议论文
  • 专利
  • 获奖
  • 著作
  • 6
  • 0
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