中文摘要：

视网膜色素上皮（RPE）细胞的结构和功能状态在老年黄斑变性等眼科疾病的发生、发展及治疗预后中起关键作用。由于成人RPE细胞属于充分分化的终末细胞，再生能力极弱或完全丧失，因此病变部位RPE细胞层的结构和功能重建唯有依赖RPE细胞移植。临床实践证明用来自体眼球其他部位的RPE细胞进行移植不能在病变部位形成有规则极性的RPE细胞单层，用胎儿RPE细胞进行移植则存在移植排斥反应，二种方法最后都不能有效地改善病人视力。本课题预实验证明牛眼视网膜提取液能促进胎儿RPE细胞生长分化并形成极性单层结构，也可诱导成人外周血干细胞分化表达黑色素。在此基础上，课题计划从视网膜提取液中纯化、克隆可促进RPE细胞生长、分化的活性因子，并用于诱导成人外周血或骨髓干细胞向RPE细胞分化发育，探讨从成人外周血或骨髓中培养获得RPE细胞用于移植的可能性，解决RPE细胞移植实践中的RPE来源问题。

结论摘要：

在RPE细胞相关疾病的治疗中，恢复RPE细胞的正常功能至关重要。本课题探讨从骨髓间充质细胞和外周血细胞经合适途径（如采用牛视网膜提取液，BRE）诱导生成RPE细胞的可能性。1.BRE能在体外显著促进RPE细胞的生长，而加热后该活性消失；经过一系列纯化步骤，可以将活性成分逐步分离，但最佳纯化条件仍需摸索；2.采取小鼠骨髓间充质细胞（BMSC）体外培养体系，添加BRE后BMSC细胞生长更为有序；传代后可呈现规则的多边形上皮形态，细胞表面有大量微绒毛，说明BRE对BMSC具有明显的促增殖作用，并能促进其向上皮样形态的转变；3.将胚胎RPE细胞与人BMSC共培养，可以诱导BMSC分化为神经样细胞，可能与视网膜的神经源性有关；4.羊膜载体能促进RPE细胞的分化，并有助于其上皮功能恢复，提示羊膜可作为RPE细胞体外培养的良好载体，用于制备移植所需的功能成熟的视网膜色素上皮细胞片层；5.尼古丁对在体内外可以改变RPE细胞正常的形态、功能；6.体外培养的胚胎RPE细胞具有干细胞特性，BRE能够促使其维持分化特性；7.全基因组表达谱分析表明BRE对骨髓间充质干细胞和人外周血细胞的基因表达具有调控作用。