温度敏感雄性不育是一种具有潜在利用价值的大白菜不育类型,但其育性转化的机理尚不清楚,本研究以温敏型大白菜雄性不育系TsCMS7311等为试材,开展了育性转换过程的cDNA-AFLP分析、相关酯酶同功酶的分离及测序分析和不育系和恢复系花蕾发育时期的cDNA-AFLP分析、相关基因克隆及其初步功能分析,取得了一下主要结果获得了育性转化中差异表达的EST序列100条,将其中未报道的3条EST登录GeneBank。获得了不育系和保持系花蕾的差异片段78个,定量分析发现oleosin等5个基因表达差异较大,可能是雄性不育的关键基因。克隆了大白菜育性转化相关的XET基因和大白菜异常花器官转录因子2个新基因。构建了大白菜异常花器官转录因子的原核表达载体、植物表达载体和干扰载体。进行了大白菜异常花器官转录因子的原核表达分析,获得了表达蛋白质。初步进行了Bra06J45-3-696基因对菜薹的过表达与抑制表达遗传转化观察分析。把恢复基因定位到白菜A09染色体一端,大约1.2M的范围内。获得6个遗传距离小于3cM的分子标记。这些研究对于进一步明确大白菜育性转化机理及雄性不育基因克隆奠定了基础。
英文主题词Chinese cabbage;CMS; temperture sensitive;cDNA-AFLP; gene clone