采用RT-PCR技术从抗人CD3和抗肺癌单抗的杂交瘤细胞中分别克隆鉴定其VL和VH基因,采用叠式PCR技术分别串联CD3VL-VH和C50VL-VH,用DNA重组技术修饰人Ig恒定区基因,使其具有特异的亲和性。再将CD3VL-VH和C50VL-VH基因片段克隆到含修饰过的人C区的真核表达载体中,共转染SP2/0细胞,筛选培养后,采用间接ELISA试验和免疫荧光试验检测抗性克隆上清中表达的双功能抗体。阳性克隆再进行亚克隆,最终获得3株能稳定分泌双功能抗体的细胞株,其表达量约为10-25ng/ml。该双功能抗体既能与人T细胞结合也能与肺癌细胞结合。该研究表明采用基因工程法和修饰人C区的方法研制双功能抗体是可行的,且优于杂交瘤技术。