中文摘要：

肺血管通透性增加是ALI发病中心环节。我们发现LPS诱导PMECs膜Cx40表达降低，导致肺血管通透性增加，诱发ALI。进一步研究发现Cx40表达降低的同时Cx40mRNA上调，提示Cx40表达在转录后受到调节。miR-155介导转录后基因沉默，抑制mRNA翻译过程。Cx40mRNA是miR-155的预测靶基因，ALI时Cx40表达降低是否通过miR-155抑制Cx40mRNA翻译过程实现的呢？本项目首先制备miR-155敲除小鼠，LPS诱导ALI模型，在体研究ALI时miR-155对Cx40表达和肺血管通透性的调节；其次，构建包含Cx40mRNA 3'UTR全序列的f-luc报告载体，应用细胞转染、微阵列基因芯片、实时PCR等技术验证Cx40mRNA是miR-155的靶基因；最后LPS诱导PMECs，研究miR-155是否通过间隙连接通道调节Cx40表达。以期为ALI防治提供新药物靶点。

结论摘要：

肺血管通透性增加是ALI发病中心环节。我们发现LPS诱导PMECs膜Cx40表达降低，导致肺血管通透性增加，诱发ALI。进一步研究发现Cx40表达降低的同时Cx40mRNA上调，提示Cx40表达在转录后受到调节。miR-155介导转录后基因沉默，抑制mRNA翻译过程。生物信息学预测提示Cx40mRNA可能是miR-155的靶基因，ALI时Cx40表达降低是否通过miR-155抑制Cx40mRNA翻译过程实现的呢？本项目首先LPS诱导野生小鼠ALI模型，发现LPS诱导后肺组织miR-155表达增加。分别敲除和过表达miR-155基因，LPS诱导后小鼠肺损伤程度减轻或加重。离体研究发现miR-155基因敲除后炎性介质TNF-a和IL-6表达将低。进一步通过小鼠骨髓移植，LPS诱导发现，ALI时miR-155主要来源于巨噬细胞，并发挥促炎作用。miR-155在LPS诱导急性肺损伤中的促炎作用在大鼠模型中也得到证实。其次，建立LPS诱导大鼠ALI模型，发现miR-155敲除后肺微血管内皮细胞Cx40表达增加，而miR-155过表达后Cx40表达将低。接着构建包含Cx40 3’-UTR的报告基因，发现Cx40mRNA 3‘-UTR包含miR-155结合位点。进一步通过在体miR-155基因敲除大鼠ALI模型，发现miR-155基因敲除后，Cx40表达增加，肺血管通透性将低，肺损伤减轻。最后LPS诱导巨噬细胞，研究miR-155对炎性因子SOCS-1的调节，发现SOCS-1是miR-155调控的靶基因。本研究证实miR-155抑制Cx40mRNA翻译，引起 Cx40表达降低和血管通透性增加，导致ALI发病，为ALI防治提供新思路，为ALI防治提供新药物靶点。本研究国内核心期刊已发表论文1篇，参加全国会议交流1篇，国外期刊已投稿SCI论文1篇，正在撰写1篇，培养博士研究生1名。